examen de labo "biochimie"

ACIDE URIQUE

Définition :

Acide présent dans le sang, produit par la dégradation des acides nucléiques et qui s'élimine par les urines.

RELEVEMENT ET TRANSMISSION DES ECHANTILLONS

Echantillon
Sang recueilli par ponction veineuse au pli du coude
Dosage sur sérum ou sur plasma hépariné
L'oxalate et le fluorure sont à proscrire car ils inhibent l'uricase enzyme utilisée dans la plupart des méthodes de dosage

Prélèvement
De préférence à jeun et au repos
Valeurs normales

2.4 - 4.8 mmol /24 h soit 400 - 800 mg /24 h
Variations pathologiques

Augmentation de l'élimination urinaire :
Leucémie myéloïde chronique, lymphosarcome, myélome, polyglobulie
Maladie de Wilson
Certaines tumeurs (cancer pulmonaire)
Syndrome de Fanconi

Diminution :
Goutte
Glomérulonéphrite chronique
Collagénose G
lomérulonéphrite A
Atteinte rénale diabétique

Transmission

Conservation du plasma :
3 jours à température ambiante 7 jours à +4°C
6 mois à -20°C

Dans le cas d'un traitement par uricolytique : pas de conservation possible
au delà de une heure à +4°C et 48 heures à -20°C

AMMONIUM

Définition :

L'ion ammonium (de formule NH₄⁺) est un cation obtenu par protonation de l'ammoniac

PRELEVEMENT ET TRANSMISSION DES ECHANTILLONS

Echantillon
Sang veineux, artériel ou capillaire, recueilli sur anticoagulant (héparinate de sodium, lithium) et placé immédiatement à +4°C.
Ne pas utiliser l'héparinate d'ammonium.

Prélèvement
Arrêter de fumer au moins 6 heures avant un prélèvement. Une cigarette, une heure avant le prélèvement augmente le taux d'ammoniac de 80 à 150 µg/l
Dosage isolé à jeun, ou répété dans le cadre d'épreuves métaboliques.

Transmission
Les conditions de transport sont très strictes :
- moins de 15 minutes : sang à placer dans la glace fondante ;
- de 15 à 120 minutes : plasma à placer dans la glace fondante ;
- supérieur à 2 heures et inférieur à 4 heures :plasma à congeler. Le plasma doit parvenir congelé au laboratoire.

Pour la conservation la molécule est stable, mais il existe une production d'ammonium in vitro par désamination, en particulier de la glutamine
Sur plasma séparé des globules en moins de 30 minutes, la conservation est de 2 heures à +4°C, et 48 heures à -20°C.

apolipoproteines A1

Définition :

Fraction protéique majeure des lipoprotéines à haute densité. Elle permet de capter le cholestérol tissulaire pour le transporter au niveau du foie où il est métabolisé et excrété

PRELEVEMENT ET TRANSMISSION DES ECHANTILLONS

Echantillon
Dosage sur sérum obtenu après centrifugation du sang recueilli par ponction veineuse.
Les échantillons de plasma ne sont pas recommandés.

Prélèvement
Dans le cadre d'un bilan lipidique (avec triglycérides), le patient doit être à jeun depuis au moins 12 heures.

Variations pathologiques

Apolipoprotéine A1	augmente en cas d'alcool, de grossesse
Apolipoprotéine A1	diminue dans les hyperlipoprotéinémies (voir bilan lipidique) dans diabète, hyperthyroïdie, anémie par carence en fer, atteinte rénale, atteinte du foie

Transmission
Les prélèvements sont centrifugés et les sérums peuvent être conservés à +4°C pendant une semaine. Pour une conservation supérieure à 7 jours, congeler les sérums entre -15 et -20°C. Les échantillons congelés ne doivent être décongelés qu'une seule fois.

BILIRUBINES

Définition :

Pigment jaune synthétisé dans le foie ou dans le sang lors de la dégradation de l'hémoglobine. Son taux dans le sang augmente fortement lors des hépatites (provoquant la "jaunisse") et des anémies par destruction des globules rouges

PRELEVEMENT ET TRANSMISSION DES ECHANTILLONS

Echantillon
Prélèvement de sang capillaire ou sang veineux.
Sérum ou plasma hépariné.
Il est préférable d'éviter l'emploi d'anticoagulants à base de potassium qui ralentissent la vitesse de la diazoréaction de la bilirubine, méthode de dosage la plus utilisée.

Prélèvement
Pas de contraintes particulières excepté lors de suspicion de maladie de Gilbert :un jeûne d'au moins 12 heures permet d' accentuer l'hyperbilirubinémie.
Dosage simultané des bilirubines totales et conjuguées.

Particularités
Eviter la stase veineuse lors du prélèvement, une partie de la bilirubine étant liée à l'albumine;
Eviter les prélèvements hémolysés ;
De nombreux médicaments ou leur métabolites peuvent induire une interférence analytique ; signaler tout traitement
valeur normal :
Bilirubine totale

Naissance :
1ière semaine :
2ième semaine :
3ième semaine :
4ième semaine :
>1 mois et adulte :

14 - 45 µmol /l
45 - 210 µmol /l
17 - 190 µmol /l
10 - 50 µmol /l
5 - 25 µmol /l
5 - 17 µmol /l

8 - 25 mg /l
25 - 120 mg /l
10 -110 mg /l
6 - 30 mg /l
3 - 15 mg /l
3 -10 mg /l

Bilirubine libre = indirecte

Adulte :

3 -12 µmol /l

2 - 7 mg /l

Bilirubine conjuguée = directe

Adulte :

2 - 5 µmol /l

1 -3 mg /l

Variations physiologiques et pathologiques

Valeurs plus élevées chez l'homme et chez le nouveau-né (voir valeurs normales)
Grossesse : diminution lors des deux premiers trimestres.
Augmentation de la bilirubine libre (=indirecte) :

Anémies hémolytiques (hémolyse toxique, médicamenteuse, infectieuse ou parasitaire, hémoglobinopathies, maladie de Minkowski-Chauffard, accident de transfusion.)
Incompatibilité foeto-maternelle
Problème de conjugaison de la bilirubine : syndrome de Criggler Najjar, maladie de Gilbert, ictère du nouveau-né.
Augmentation de la bilirubine conjuguée (= directe) :

Cholestases : hépatites virales, atteintes hépatiques, obstructions biliaires (calculs biliaires, pancréatite, tumeur du pancréas, inflammation des canaux biliaires, kyste du cholédoque, tumeur de l'arbre biliaire), absence de dilatation des voies biliaires (certains médicaments, lymphome, amylose).
Maladies constitutionnelles (très rares) : syndrome de Dubin-Johnson, syndrome de Rotor.

Transmission
Il existe une très grande sensibilité de la bilirubine à la photo oxydation par la lumière ;cette oxydation est de plus température dépendante
Il faut utiliser des flacons ambrés ou enveloppés dans du papier d'aluminium surtout en pédiatrie.

Durée de conservation :
- 5 à 6 heures sur sérum ou plasma à température du laboratoire
- 48 heures à +4°C
- plusieurs mois à -20°C.

CALCIUM TOTAL

PRELEVEMENT ET TRANSMISSION DES ECHANTILLONS

Echantillon
Sérum ou plasma hépariné obtenu après centrifugation du sang prélevé par ponction veineuse

Prélèvement
Importance de la position, debout ou couché : en position debout le volume plasmatique est réduit d'environ 12%. La concentration en calcium ionisé ne varie pas, par contre le calcium total augmente en position debout de 5 à 10%.

Par rapport aux sujets ambulatoires les patients alités présentent une concentration de calcium abaissée.

Particularités
Un temps de pause du garrot < 1 min doit être pratiqué pour éviter toute hémo-concentration visible surtout sur les grosses molécules et les petites molécules liées, comme le calcium non ionisé.

Des variations importantes de la calcémie mesurée sont observées en fonction de la concentration en albumine plasmatique, ce qui justifie un dosage simultanée de ces 2 paramètres ou à défaut des protides totaux et du calcium.

Transmission
Paramètre stable : conservation 24 heures sur sang total, 1 semaine sur plasma à température ambiante et 3 semaines sur plasma à +4°C.

CREATININE

Définition :

La créatinine est un déchet métabolique normal qui est excrété dans l'urine. Elle est produite par l'organisme à un rythme constant. La détermination de la clairance et du taux sérique de la créatinine sert d'indicateur permettant d'évaluer l'état fonctionnel du rein.

PRELEVEMENT ET TRANSMISSION DES ECHANTILLONS

Echantillon
Prélèvement de sang capillaire ou sang veineux
Sérum ou plasma hépariné obtenu par centrifugation du sang total recueilli avec ou sans anticoagulant.

Prélèvement
Le matin, car il existe des variations nycthémérales.
A jeun : le jeûne doit être modéré car l'acétoacétate produit au cours du jeûne interfère sur de nombreuses techniques de dosages.
Etude de la fonction rénale.
Dosage simultané sur plasma et urines des 24 heures pour déterminer la clairance de la créatinine.

Valeurs normales

Homme : 65 à 120 µmol/l soit 7 à 13 mg/l
Femme : 50 à 100 µmol/l soit 6 à 11 mg/l
Variations physiologiques et pathologiques

Diminutions :
Valeurs plus faibles chez l'enfant Myopathie avec atrophie musculaire importante

Augmentations :
Sujet âgé
Effort
Alimentation riche en protéines
Jeûne prolongé
Insuffisance rénale
Relation avec une pathologie : leucémie, goutte, pré-éclampsie, hyperthyroïdie, acromégalie, hypertension artérielle et insuffisance cardiaque.

Transmission
Conservation :
- sur sang total à température ambiante : 48 heures ;
- sur plasma à température ambiante ou à +4°C : 7 jours ; à -20°C : plusieurs mois
FER

Définition :

Le Fer est un des sels minéraux indispensables au bon fonctionnement de l'organisme. Il joue un rôle dans le transport de l'oxygène du poumon vers les organes, est un constituant de la myoglobine des muscles et de nombreux enzymes
PRELEVEMENT ET TRANSMISSION DES ECHANTILLONS

Echantillon
Sérum ou plasma hépariné obtenu par centrifugation du sang veineux prélevé par ponction sur tube sec ou en présence d'anticoagulant
Ne pas utiliser d'anticoagulants à base d’oxalate ou citrate qui complexent le fer.

Prélèvement
Pour un suivi de surcharge chronique, il convient de standardiser l'heure de prélèvement.
Le matin, à jeun, en minimisant la stase veineuse.
Valeurs normales

Homme :
10 - 30 µmol /l
soit 60 - 170 µg / 100 ml

Femme :
9 - 28 µmol /l
soit 50 - 160 µg / 100 ml

Nouveau-né :
20 - 35 µmol /l
soit 110 - 200 µg / 100 ml

Variations pathologiques
- Diminution :
  Carences d'apports : prématurés, malnutrition Malabsorptions , gastrectomies
  Augmentation des besoins : grossesses répétées, allaitement
  Pertes sous forme d'hémorragies : menstruations abondantes, ulcère gastro-intestinal, cancer intestinal, gastrique, colique, utérin, hémorroïdes, hémorragies intra-viscérales, hernie hiatale, ankylostomiase (parasitose)
  Syndrome inflammatoire (rhumatismal, infectieux, affections malignes)
- Augmentation :
  Hémochromatose primitive(rare) : maladie héréditaire avec absorption intestinale du fer augmentée
  Hémochromatose secondaire par excès d'apport de fer : transfusions répétées
  Alcoolisme, cirrhose hépatique, cytolyse hépatique
  Thalassémies
  Anémie
  saturnisme
  
  Transmission
  Conservation :
  - 7 jours sur sérum ou plasma à température du laboratoire
  - 3 semaines à +4°C
  - plusieurs mois à -20°C
POTASSIUM

Définition :

le potassium est le minéral majeur se trouvant à l'intérieur de nos cellules.

Le potassium joue un rôle dans :
- l’excitabilité neuromusculaire,
- la fabrication des protéines,
- la mise en réserve des glucides dans le muscle sous forme de glycogène,
- le fonctionnement des cellules du cœur,
- les mouvements d’eau dans l’organisme (en association avec le sodium et le chlore
PRELEVEMENT ET TRANSMISSION DES ECHANTILLONS

Echantillon
Dosage sur sérum ou plasma hépariné (sel de lithium ou d'ammonium) obtenus par centrifugation de sang total recueilli par ponction veineuse.
Dosage sur sang total artériel prélevé lors de la mesure des gaz du sang et du pH.

Il faut noter que le taux de potassium sur plasma et sur sang total est de 0.1 à
0.7 mmol plus bas que sur sérum. L'importance de la différence est liée à la libération de potassium intra-plaquettaire lors de la coagulation et donc fonction du nombre de plaquettes ; le plasma doit donc être préféré au sérum.

Prélèvement
Il n'existe pas de liaison aux protéines, ce paramètre n'est donc pas influencé par la position du sujet ou la stase veineuse.

Particularités
Toute activité musculaire au moment du prélèvement, voire simplement la pose trop prolongée d'un garrot trop serré, entraîne une fuite de potassium cellulaire. Tout prélèvement difficile est sujet à caution pour un rendu de résultat fiable.
Toute hémolyse du prélèvement, même légère, conduit à une augmentation du potassium et doit être notée lors du rendu du résultat.
Valeurs normales

40 - 100 mEq / 24 heures
Variations pathologiques
- Diminution :
  Perte de potassium d'origine non rénale : diarrhée, apports insuffisants (anorexie, alcoolisme), alcalose métabolique, syndrome de malabsorption
- Augmentation :
  Apport excessif de potassium en perfusion
  Hyperaldostéronisme
  Insuffisance rénale
  Deshydratation
  Maladie de Cushing
  Intoxication aux salicylés
Transmission
Paramètre d'urgence
Une source d'erreur préanalytique est la libération de potassium dans le sang total à + 4°C, par non-maintien du gradient intracellulaire/ extracellulaire par inhibition de la glycolyse. Inversement, à 37°C la glycolyse provoque une entrée de potassium dans les cellules, ce flux s'inverse lorsque tout le glucose est consommé.
Tout prélèvement pour dosage de potassium doit donc être maintenu à 20-25°C et centrifugé ou analysé en moins d'une heure.
Conservation sur sérum ou plasma obtenus à partir de sang centrifugé dans l'heure suivant le prélèvement, ou sur urines :une semaine à +4°C, au moins un an à -20°C.

PROTEINES TOTALES

Définition :
Protidémie = quantité de protéines sériques = protéines totales

Les protéines sériques jouent des rôles multiples :
Dans la pression sanguine (par la pression oncotique assurée par les albumines)
Transport de nombreuses substances par les albumines (notamment les hormones)
Hémostase grâce au fibrinogène
Immunité (gamma globulines)
Inflammation : rôle des alpha et bétaglobulines

PRELEVEMENT ET TRANSMISSION DES ECHANTILLONS

Echantillon
Sang veineux recueilli dans un tube ne contenant pas d'anticoagulant (protéines sériques) ou dans un tube contenant un anticoagulant (protéines plasmatiques).

Les sels d'héparines (Li, Na, NH4+),le citrate, l'EDTA sont des anticoagulants qui n'interfèrent pas sur le dosage des protéines.

Prélèvement
Le jeûne n'est pas impératif.

Il existe des variations induites par le changement de position : allongée /debout. Ces variations peuvent atteindre 8 à 10%. En 30 minutes, la répartition des liquides est atteinte et les variations sont stabilisées.
Chez un sujet alité depuis plusieurs jours, on assiste à une diminution de la concentration de protéines pouvant atteindre 5 grammes .

Particularités
Pose du garrot < 1 min
En cas de pose prolongée d'un garrot, avant le prélèvement, la protidémie totale est surévaluée d'environ 5%, en raison de l'hémoconcentration induite. Si la stase veineuse est prolongée cette augmentation peut atteindre près de 20%.

Transmission
Le sérum et le plasma décantés se conservent plusieurs jours à +4°C et des mois à-20°C.

PHOSPHORE

Définition :

Composant essentiel à la constitution de la matière vivante

PRELEVEMENT ET TRANSMISSION DES ECHANTILLONS

Echantillon
Sang veineux recueilli sans anticoagulant ou sur héparine : proscrire l'emploi de citrate, EDTA ou oxalate susceptibles d'interférence sur la technique de dosage.

Prélèvement
Prélèvement effectué à jeun, le matin : existence de variations nycthémérales.

Valeurs normales

20 - 45 mmol / 24 h soit : 650 - 1400 mg / 24 h
Variations physiologiques et pathologiques

L'élimination des phosphates dans les urines est variable selon l'âge et le poids (0.02 g/ kg/ 24h chez l'adulte, 0.08 g/ kg/ 24 h chez l'enfant).

Diminution :
Hypoparathyroïdie
Maladies infectieuses (périodes de fièvre)
Néphropathies

Augmentation :
Hyper-parathyroïdie
Rachitisme vitamino-résistant
Acidose métabolique d'origine rénale
Syndrome de Toni-Debré-Fanconi
Affections neurologiques
Leucémies myéloïdes chroniques

Transmission
Centrifugation rapide du prélèvement dans un délai inférieur à 2 heures.

Sur le plasma ou le sérum, séparés des globules, la concentration de phosphore est stable 7 jours à +4°C et plusieurs mois à -20°C.

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سبحان الله وبحمده ، سبحان الله العظيم

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